荧光素酶

自然界中的荧光素酶：是自然界中能够产生荧光的酶的系统，如发光真菌，发光海星，发光鱼，发光节虫，发光甲虫等。萤火虫荧光素酶：目前常用的萤火虫荧光素酶来源于北美萤火虫（Photinus pyralis）,是一个61KDa的单体酶，无需表达后修饰，直接具有完全酶活性，反应需要底物荧光素以及ATP、氧气、镁离子等。 海肾荧光素酶：来源于海肾（Renilla reniformis），是一个36KDa的单体酶，表达后无需修饰，即可具有完全酶活，反应只需要腔肠素和O₂参与。 Gussia荧光素酶：来源于海洋桡脚类生物Gaussia princeps，是一个19.9kDa单体酶，只有185个氨基酸，具有一个16aa 的分泌信号肽，可以被细胞分泌到细胞外，反应只需要腔肠素和O₂参与。

腔肠素/Coelenterazine美国Goldbio品牌的两种腔肠素，分别是天然腔肠素/Coelenterazine及其衍生物Coelenterazine 400a。天然腔肠素/Coelenterazine：普 遍认为是天然的腔肠荧光素，是海肾荧光素酶（Rluc）的作用底物，具有许多用途。可用于检测活细胞中钙离子浓度，基因报告分析，BRET（生物发光共振 能量转移）研究，ELISA，HTS，组织或细胞中超氧阴离子和过亚硝酸盐的化学发光检测，在460-470nm之间发射荧光。分子式：C₂₆H₂₁N₃O₃ 分子量: 423.48 g/mol ，纯度：95% ，保存：-15°C避光，保存在惰性气体下。腔肠素400a/ Coelenterazine 400a: 是BRET研究中海肾荧光素酶（Rluc）的首选底物，此腔肠素衍生物在390 nm和400nm之间发蓝色光，对GFP acceptor的光发射干扰最小。分子式：C₂₆H₂₁N₃O 分子量：: 391.48 g/mol ，纯度：95%，保存：-15°C避光，保存在惰性气体下。此外，Nanolight 除了提供天然腔肠素/Coelenterazine和Coelenterazine 400a，还提供体内实验用水溶性腔肠素，体外实验水溶性腔肠素，Coelenterazine h，Coelenterazine f，Coelenterazine e等。 还在为找不到水溶性腔肠素而烦恼吗？还在为溶解腔肠素的溶剂对动物的毒害而烦恼吗？下面介绍的水溶性腔肠素，将解决您的烦恼！

体内实验水溶性腔肠素/Water-soluble Coelenterazine (CTZ-SOL) for in vivo use：腔 肠素用于体内成像研究时通常是结合其他醇类溶解在丙二醇或甲醇中。大剂量的静脉注射丙二醇在短时间内即可产生毒性，包括高渗透压，增加阴离子间隙代谢性酸 中毒（由于乳酸中毒），急性肾损伤，似败血症综合症。而使用水溶性腔肠素可以避免此类情况的发生，是制定的等渗透压，容易由肾脏分泌。因此除了重复静脉注 射，水溶性的腔肠素可以注入的浓度高达500µg/100µl ，在体内的腔肠素水平达到很高，并产生较高的Gaussia荧光素酶信号。成分：天然腔肠素 +用于水溶的无毒添加剂。

使用实例：